背景:有机磷类(OPS)和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶(AchE)的正常功能有抑制作用,其抑制率与药物浓度呈正相关。正常情况下,酶催化乙酰胆碱水解,其水解产物与显色剂反应产生黄色物质,但是如果样品中有有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留,就会对酶的活性产生抑制作用,当向含有农药的样品中添加底物和显色剂时,酶由于丧失活性而不能催化底物分解并完成显色反应。通过分光光度计于412nm波长下比色,能测出颜色变化造成的吸光度之差,再通过吸光度的变化计算出酶的抑制率,通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在,抑制率越大,说明样品中残留农药的含量越高。
纯化方式:亲和纯化
缓冲液:0.01M PBS(pH=7.4),5%甘油,5% BSA,10%蔗糖
储存温度:-20℃,避免反复冻融